Главная Регистрация Статистика Контакты RSS 2.0
   
 
 
Навигация
Главная Все статьи сайта Мировые новости Обратная связь Непрочитанное
 
 
Базовые дисциплины
Анатомия Физиология и этология Латинский язык Цитология Гистология Эмбриология Микробиология Иммунология Генетика Вирусология Фармакология и токсикология
 
 
Естественно-научные дисциплины
Химия Биохимия
 
 
Специальные и клинические дисциплины
Патология Акушерство и гинекология Эпизоотология, инфекционные болезни Паразитология и инвазионные болезни Внутренние незаразные болезни Хирургия
 
 
Другие дисциплины
Зоогигиена Разведение Кормление, кормопроизводство
 
 
Ветеринарная онлайн-библиотека » Новости » Вязка и искусственное осеменение собак (реферат)

Новости , Акушерство и гинекология : Вязка и искусственное осеменение собак (реферат)
автор: Admin 6 декабря 2009 просмотров: 18518






пробирку на 10 мл с завинчивающейся крышкой для клеточной культуры).

Пробирку с образцом помешают в изолирован­ную колбу, колбу кладут в термос поверх слоя льда и оборачивают бумагой. Перед осеменением сперму постепенно согревают до 30-35 С.


ОБРАБОТКА И ЗАМОРАЖИВАНИЕ СПЕРМЫ СОБАК
Подготовка и разбавление

Для замораживания к основному раствору TRIS добавляю глицерин и антибиотики (табл. 1). Объем добавляемого глицерина составляет от 12 до 16 мл (6 и 8% общи о объема соответствен­но) в зависимости от техники замораживания: для автоматического замораживания добавляют 6% глицерина, для ручного — 8%. В раствор добавляют дистиллированную воду (188 или 184 мл вместо стандартных 200 мл).

В базовый раствор ТRIS с глицерином до­бавляют 20% яичного желтка. Яичный желток получают от кур, проверенных па отсутствие патогенных факторов (предназначенных на экспорт или домашних). Желток отделяют от бел­ка, выкладывают на лист чистой бумаги, осторожно прокалывают и сливают в воронку и энергично взбивают стеклянной лопаткой, мак­симально измельчая его частицы, — это позволяет снизить связывание головок сперматозои­дов частицами спермы. Наконец, желток смешивают с буферным раствором TRIS до 30 С. Смесь хорошо взбалтывают и нагревают до 35 С. Предварительно приготовленный разбавитель можно замораживать и сохранять в таком виде в течение 2 месяцев. Перед применением его размораживают на водяной бане при температуре 35 С.

Проводят микроскопическое исследование спермы на соответствие перечисленным выше критериям, затем ко второй фракции эякулята добавляют по каплям подогретый до 35 С разбавитель, пока необходимая концентрация не будет достигнута. В лаборатории для замораживания обычно используют образцы с общей концентрацией сперматозоидов до 100×10 6/мл. Однако можно уменьшить наполовину.

Охлаждение.

После разбавления несколько капель образца исследуют сперму под микроскопом, а разбавленную сперму сливают в пластиковые центрифужные пробирки, которые помещают в сосуд с водой, подогретой до 35С. Затем сосуд переносят в холодильник и оставляют на 2 часа при температуре 4С. За это время сперма охлаждается до 4-5 С, а глицерин, выполняющий роль защитного фактора, проникает в мембрану сперматозоидов.

 

Упаковка

Сперму вынимают из холодильника, осторож­но взбалтывают и немедленно помещают в пла­стиковые соломины (пайетты) емкостью 0,5 мл. Для выполнения процедуры применяют специ­альный отсос или насасывают ртом через латексную трубку. При распределении спермы следует проследить за тем чтобы порошок, находящийся между концами фильтров соломины, пропитался жидкостью и затвердел. Сначала соломины запол­няют наполовину, после чего, оставляя пузырек воздуха, доливают, не доводя 1 см до верха. Пузы­рек воздуха препятствует переливанию спермы (за счет изменения давления при разморажива­нии). После этого соломину запечатывают.

Техника замораживания

Существуют два альтернативных метода замороз­ки — ручная и автоматическая. Доля глице­рина в составе разбавителя зависит от применя­емого метода. При ручной заморозке используют контейнер (30 х 40 х 30 см) из полистирола со съемной металлической полкой, помешенной на 10 см ниже края. Контейнер заполняют жид­ким азотом до уровня, находящегося на 4 см ниже полки.

Заполненные соломки (8-10 максимально) захватывают пинцетом, помещают горизонталь­но на полку и оставляют в испаряющемся азоте на 8 минут. Затем пинцет охлаждают в жидком азоте, приподнимают и поворачивают с его по­мощью пайетты, одну за другой, чтобы удостовериться в полной кристаллизации их содержимого . После этого пайетты погружают в жидкий азот. Такую процедуру называют статической в связи с присутствием постоянного нерегулиру­емого потока испаряющегося азота в период охлаждения и заморозки.
Автоматическая заморозка подразумевает ис­пользование машины. Такой способ называют динамическим, поскольку испаряющийся азот поступает в морозильную камеру с различной скоростью в зависимости от заданной програм­мы, позволяющей регулировать темпы замороз­ки. Пайетты замораживают в гори­зонтальном положении на полке со съемной крышкой, причем в морозильной камере может находиться несколько таких полок. Программа заморозки включает следующие режимы:

• -2 0С/мин, начиная с +4 0С до -7 0С
• -50 0С /мин, от -7 0С до -100 °С
• -25 0С /мин, от-100 0С до-180 0С.
после окончания процедуры полку помещают непосредственно в жидкий азот.
Размораживание
Пайетты размораживают на водяной бане (в тер­мосе) при температуре 70 "С в течение 8 секунд. После размораживания их ставят вертикально фильтром вниз, распечатывают крышку, встряхи­вают, чтобы пузырек воздуха мог подняться вверх. Соломку вскрывают и несколько капель образца помещают на подогретое предметное стекло для оценки параметров спермы после разморажива­ния. До восстановления подвижности спермато­зоидов проходит некоторое время, обычно 2 ми­нут бывает достаточно. В связи с тем, что разные лаборатории используют различные техники за­мораживания, при размораживании образца спер­мы, полученного из какой-то определенной ла­боратории, необходимо строго соблюдать все по­лученные оттуда рекомендации, поскольку процессы замораживания и размораживания тес­но связаны между собой.
ИСКУССТВЕННОЕ ОСЕМЕНЕНИЕ
Искусственное осеменение свежей спермой. Практикуется в случаях, если естественная вяз­ка невозможна по ряду причин: кобель и сука живут довольно далеко друг от друга; заводчик намерен осеменить несколько сук или опасает­ся прямого контакта суки с производителем в связи с распространенностью инфекционных заболеваний.
Искусственное осеменение замороженной спермы
При наличии свежей спермы процедуру осеме­нения проводят в день овуляции, а потом через2 дня повторяют. При использовании заморо­женной спермы, которая характеризуется сни­женной жизнеспособностью, поскольку процес­сы замораживания и размораживания оказыва­ют негативное воздействие на акросомы и мембраны сперматозоидов, — осеменение осу­ществляют через 1 -2 дня после овуляции, и вто­рую процедуру проводят через 24 часа после пер­вой. Пробы прогестерона в сыворотке крови служат хорошим индикатором овуляции. Кон­центрация прогестерона, определяемая радио­иммунным методом, должна поддерживаться на
уровне 30 нмоль/л (10 нг/мл) в первый день и между 55 и 75 нмоль/л (18-25 нг/мл) на второй день осеменения. Быстрый иммуноферментный метод определения также подходит для оценки качественного и колличественного содер­жания прогестерона.

Техника осемения
Свежую сперму вводят во влагалище с помощью жесткого пластикового катетера, применяемого для осеменения коров, но укороченного до нужного размера. Катетер снабжен шприцем на 2-5 мл с резиновым поршнем. (рис. 6). Необходимо иметь в виду , что не всякий шприц можно использовать, поскольку некоторые типу резин оказывают токсическое воздействие на сперматозоиды.

Рис. 6 Три различных вида катетеров с нейлоновой направляющей трубкой

Рис. 6 Три различных вида катетеров с нейлоновой направляющей трубкой, используемых для трансцервикального внутриматочнаго искусственною осеменения собак. Внизу обычный пластиковый катетер для коров, , укороченный до необходимой длины для интра- вагинального осеменения у собак.

 

 

 

 


 

Вводимый объем не должен







 
 
Ключевые теги: сперма, сперматозоиды, пенис, вязка, кобель, осеменение, железы
Уважаемый посетитель, Вы зашли на сайт как незарегистрированный пользователь. Мы рекомендуем Вам зарегистрироваться либо зайти на сайт под своим именем.

Другие новости по теме:

  • РАЗБАВЛЕНИЕ, ХРАНЕНИЕ И ТРАНСПОРТИРОВКА СПЕРМЫ (реферат)
  • Физиология спермиев и оценка качества спермы (реферат)
  • МИКРОБИОЛОГИЯ ЯИЦ
  • Нейрогуморальная регуляция половой функции у самцов и самок (реферат)
  • Заболевания репродуктивных органов


  •  (голосов: 7)
     
     
     
    Авторизация
    Логин:
    Пароль:
     
     
    Партнёры
     
    Календарь
    «    Май 2018    »
    ПнВтСрЧтПтСбВс
     
    1
    2
    3
    4
    5
    6
    7
    8
    9
    10
    11
    12
    13
    14
    15
    16
    17
    18
    19
    20
    21
    22
    23
    24
    25
    26
    27
    28
    29
    30
    31
     
     
    Метки
    бактерии, Болезнь, вакцина, вещество, Вирус, Возбудитель, гормоны, железы, животные, заболевание, инфекция, кислота, кислоты, кишечник, клетка, клетки, корм, кровь, Лечение, матка, мозг, молоко, натрий, оболочка, опухоль, организм, органы, печень, препарат, процесс, раствор, реакция, свиньи, скот, сосуды, сыворотка, телята, температура, ткани, функции

    Показать все теги
     
    Рекомендуем
     
     
     
    Каталог : Анатомия Физиология и этология Латинский язык Гистология Эмбриология Микробиология Вирусология Генетика Фармакология и токсикология Биохимия Патология Акушерство и гинекология Эпизоотология, инфекционные болезни Паразитология и инвазионные болезни Внутренние незаразные болезни Хирургия Зоогигиена Разведение животных Кормление, кормопроизводство
    При использовании материалов сайта, гиперссылка на на www.vetlib.ru обязательна. 
    Copyright © 2009-2017 VetLib.ru