автор: Admin 8 декабря 2010 просмотров: 40103

(при отравле­нии кислотами, солями сильных кислот и тяжелых ме­таллов), щелочная (при отравлении едкими щелочами, солями аммония и карбамидом, карбонатами и си­ликатами), наличие посторонних включений (кристаллы солей и пестицидов, кусочки свинца, семена и другие части ядовитых растений), которые осторожно отбирают и тщательно изучают при помощи лупы, иногда микроскопа и химических реакций.

Каждый присланный объект исследуют отдельно при помощи чувствительных и специфических методов и ре­акций, которые предварительно со всеми тонкостями освоены токсикологом. Иногда целесообразно провести параллельно контрольное исследование с чистым веще­ством, наличие которого предполагается в объекте. Но во всех случаях ставят «холостой» опыт с теми же реак­тивами и последовательностью реакций, но без опреде­ляемого вещества. В случае появления каких-либо от­клонений необходимо реактивы подвергнуть дополни­тельной очистке.

В зависимости от степени чистоты различают хими­ческие реактивы следующих квалификаций: чистый — ч. (с этикеткой или полосой на этикетке красного цвета), чистый для анализа — ч. д. а. (синего цвета), химически чистый — х. ч. (зеленого цвета), особой чистоты — ос. ч. (желтого цвета) и прочие реактивы (светло-ко­ричневого цвета). На посуде с ядовитыми реактивами наклеена дополнительная желтая этикетка с надписью «Яд», с огнеопасными — красная с надписью «Огнео­пасно»; взрывоопасными — голубая с надписью «Взры­воопасно», несовместимыми с водой — зеленая с над­писью «Беречь от воды».

В случае отсутствия каких-либо сведений о предпо­лагаемой причине отравления животных химик-токсико­лог должен проводить анализ по предполагаемой при­мерной схеме: выявление металлических ядов и мышь­яка, изолируемых минерализацией; алкалоидов и сапо­нинов в кормах; цианидов, изолируемых отгонкой с водяным паром; нитратов, нитритов, карбамида и на­трия хлорида; соединений фтора; ТМТД и ртутьоргани-ческих протравителей зерна; ФОС и ХОС.

Иногда при отсутствии специфических методов обна­ружения яда проводят биопробу на животных, рыбах или насекомых.

Все химические исследования по каждой экспертизе выполняет от начала до конца один химик-токсиколог. В случае качественного обнаружения яда проводят затем количественное определение, желательно несколь­кими методами. Все выполняемые операции и реакции в хронологической последовательности тщательно зано­сят в рабочий журнал, а при количественном определе­нии и расчеты.

Каждое полное исследование заканчивают составле­нием экспертизы или акта химико-токсикологического исследования по утвержденным формам, которые явля­ются юридическим документом. B заключение указыва­ют, обнаружены или не обнаружены ядовитые вещества (перечислить) и в каких концентрациях. На основании результатов исследований приводятся рекомендации по профилактике отравления животных.

Диагноз же отравления ставят не специалисты лабо­ратории, а практический врач или же его ставят ко­миссионно с учетом всех имеющихся данных (анамнеза, симптомов отравления, результатов вскрытия и химико-токсикологических (бактериологических и гистологиче­ских) исследований, иногда биопробы на живых объек­тах).

 

 

ЗАНЯТИЕ № 3

 

3. Тема:   МЕТОДЫ ИЗВЛЕЧЕНИЯ ЯДОВИТЫХ ВЕЩЕСТВ ИЗ КОРМА И ПАТМАТЕРИАЛА

Цель занятия: освоить методы извлечения ядовитых веществ из корма и патматериала

Материадьное обеспечение: химическаая посуда, колба Кьельдаля, воду дистиллированная, ацетон, хлороформ, н-гексан и другие органические растворители, пробы корма и патматериал.

Ход работы:

Основные методы извлечения ядов — экстракция жид­костями, изоляция минерализацией и отгонкой с водя­ным паром.

В зависимости от растворимости ядовитых веществ для экстракции используют воду, ацетон, хлороформ, н-гексан и другие органические растворители.

Минерализацию осуществляют серной кислотой и пергидролем, соляной кислотой и калия хлоратом, а также методом сухого озоления.

Для минерализации серной кислотой и пергидролем берут 20—25 г патматериала в колбу Кьельдаля на 500 мл, заливают 10—12,5 мл пергидроля, тщательно смешивают и добавляют 6—7 мл концентрированной серной кислоты. После ослабления бурной реакции со­держимое колбы осторожно подогревают на газовой горелке или электроплите, периодически добавляя по 1—2 мл пергидроля до тех пор, пока оно не станет про­зрачным и не будет темнеть при дальнейшем нагрева­нии.

В полученном минерализате можно экспресс-мето­дом обнаружить ртуть, медь, цинк и мышьяк.

Для минерализации соляной кислотой и калия хло­ратом (бертолетовой солью) берут 20—25 г патматериа-ла в колбу Кьельдаля, заливают соляной кислотой, по­догревают и добавляют небольшими порциями калия хромат до тех пор, пока жидкость не станет прозрачной. В минерализате экспресс-методом можно обнаружить свинец и барий.

Отгонку с водяным паром применяют для извлечения синильной кислоты, формальдегида, фенола, некоторых ХОС, ФОС и других веществ.

Перегонный аппарат состоит из парообразователя (круглодонная колба со стеклянной трубкой в пробке), отгонной колбы с двумя трубками в пробке (одна идет почти до дна от парообразователя, другая — короткая соединена с холодильником), водяного холодильника и приемной колбы. Навеску измельченного материала помещают в отгонную колбу, подкисляют виннокамен­ной или щавелевой кислотой и подключают кипящий парообразователь, после чего начинают подогревать отгонную колбу. Дистиллят собирают в приемную кол­бу. В первых его порциях можно определять синильную кислоту, в последующих — другие вещества.

Для количественного определения берут точную на­веску материала и отгонку продолжают до тех пор, пока перестанет проявляться специфическая качественная реакция на ядовитое вещество. Полученный дистиллят объединяют, замеряют его объем и количественно опре­деляют содержание вещества.

 

 

ЗАНЯТИЕ № 4

 

4. Тема:   МЕТОД тонкослойнОЙ  хроматографиИ

 

Цель занятия: освоить метод тонкослойной хроатографии.

Материадьное обеспечение: ацетон, н-гексан, петролейный эфир, бензол, хлороформ или их смеси,  спирты, хлороформ, этилацетат, пластинки с тонким слоем сорбента, пробы корма и патматериал.

Ход работы:

В основе метода лежит разделение ядовитых веществ (хроматография), выполняемое на слое адсорбента, ко­торый нанесен на подложку (стеклянную пластинку). Это один из простых, достаточно чувствительных и до­ступных для практических лабораторий методов. К тому же он не требует дорогостоящих, сложных приборов и дает возможность производить качественное и количе­ственное определение многих пестицидов, ядов расти­тельного и микробного происхождения.

Основные этапы тонкослойной хроматографии вклю­чают экстракцию (извлечение) ядовитых веществ из корма и патматериала, очистку экстрактов от посто­ронних примесей, концентрирование их, разделение на пластинке, проявление и количественное опреде­ление.

Экстракция — это процесс переноса растворен­ного вещества из одной жидкой фазы в другую (несме-шивающуюся с ней). В качестве экстрагирующего рас­творителя берут обычно органические вещества, в кото­рых хорошо растворяется яд. Например, для экстракции ХОС используют ацетон, н-гексан, петролейный эфир, бензол, хлороформ или их смеси; для ФОС — спирты, хлороформ, этилацетат.

Берут навеску измельченного объекта, заливают растворителем и проводят экстракцию в аппарате Со-ксклета, при помощи смесителей, в шуттель-аппарате или путем простого настаивания в течение 12—14 ч.

Очистку экстрактов проводят методом омы­ления, сульфирования, распределения между двумя не-смешивающимися жидкостями, осаждения жиров, вос-ков и белков, колоночной хроматографии. Точность исследования зависит от правильно подобранного в каждом конкретном случае метода очистки экст­рактов.

Омыление применяют при определении устойчивых к щелочному гидролизу препаратов. Например, нельзя омылять ГХЦГ, ДДТ, производные мочевины, некото­рые ФОС.

Сульфирование осуществляют в делительной ворон­ке, где н-гексановый экстракт осторожно встряхивают с концентрированной серной кислотой или насыщенным раствором безводного сульфата натрия в концентриро­ванной серной кислоте (100 г Na2SO4 в 1 л H2SO4). Органический слой обрабатывают до тех пор, пока раствор сульфата натрия в серной кислоте не будет бесцветным.

Метод распределения между двумя несмешивающи-мися жидкостями основан на различии коэффициентов распределения ядовитых веществ и сопутствующих ве­ществ между двумя несмешивающимися растворителя­ми. С

Уважаемый посетитель, Вы зашли на сайт как незарегистрированный пользователь. Мы рекомендуем Вам зарегистрироваться либо зайти на сайт под своим именем.