Главная Регистрация Статистика Контакты RSS 2.0
   
 
 
Навигация
Главная Все статьи сайта Мировые новости Обратная связь Непрочитанное
 
 
Базовые дисциплины
Анатомия Физиология и этология Латинский язык Цитология Гистология Эмбриология Микробиология Иммунология Генетика Вирусология Фармакология и токсикология
 
 
Естественно-научные дисциплины
Химия Биохимия
 
 
Специальные и клинические дисциплины
Патология Акушерство и гинекология Эпизоотология, инфекционные болезни Паразитология и инвазионные болезни Внутренние незаразные болезни Хирургия
 
 
Другие дисциплины
Зоогигиена Разведение Кормление, кормопроизводство
 
 
Ветеринарная онлайн-библиотека » Новости » Лекции по морфологии птиц: цитология, гистология, эмбриология, анатомия

Новости , Анатомия : Лекции по морфологии птиц: цитология, гистология, эмбриология, анатомия
автор: Admin 22 июля 2009 просмотров: 169251






важного значения и определяются задачами исследования.

Взятие и фиксирование материала. Максимальные размеры кусочков составляют 1х1х0,5см; соотношение объема материала и фиксирующей жидкости должно быть не менее 1:9.

Вырезание кусочков для фиксации является одним из ответственных этапов в приготовлении качественных микропрепаратов. При выполнении этой операции необходимо знать основные особенности анатомо-гистологического строения органов, чтобы правильно выбрать место и направление разреза, а также величину вырезаемого кусочка. Так, если орган состоит из участков, различных по своему строению. Необходимо производить разрез таким образом, чтобы все они попали в кусочек, а при невозможности - брать кусочки отдельно из каждого участка.

Взятый из органа птицы образец ткани погружают в фиксатор - простой (70-96%-й спирт, 10-12%-й формалин, растворы уксусной кислоты, бихромата калия, осмиевой кислоты) или сложный (смеси простых фиксирующих жидкостей или солей тяжелых металлов в определенных пропорциях, обеспечивающие рН и молярность, близкие к таковым в организме). Действие фиксаторов проявляется в том, что в тканях и органах, в результате сложных биофизических процессов, происходит необратимая коагуляция белков, жизнедеятельность прекращается, то есть клеточные структуры становятся мертвыми. Они теперь находятся в том функциональном состоянии, в котором их застигла смерть, то есть фиксированными. Фиксация приводит к уплотнению и уменьшению объема образца.

Уплотнение образцов ткани. Цель этого этапа - достичь высокой плотности и пластичности материала для того, чтобы приготовить из него тонкие срезы. Применяют уплотняющие среды - парафин, целлоидин, желатин, органические смолы или замораживание. Пропитка парафином продолжается 1-4 часа, целлоидином - до 1-3 недель. Кусочек ткани предварительно обезвоживают (проводят через спирты возрастающей концентрации: 600, 700,800, 900, 960, 1000); затем спирт вытесняют промежуточной средой, способный смешиваться со спиртом и одновременно растворять уплотняющее вещество. При использовании парафина промежуточной средой служат циклические углеводороды (бензол, ксилол) или хлороформ. Для того, чтобы избежать перепада температур (парафин плавится при 600С) после вытеснения спирта ксилолом, образец погружают 2-3 часа в смеси парафина с ксилолом при температуре 380С. Из уплотненного парафином образца вырезают блоки, из которых и готовят тонкие срезы, способные пропускать свет, что является необходимым условием для световой микроскопии.

Приготовление срезов. Наиболее тонкие срезы, толщиной от 5 до 7 мкм, удается изготовить из материала, залитого в парафин. Из образцов, уплотненных целлоидином, готовят срезы толщиной 10-30 мкм. Срезы получают на санных или ротационных микротомах; для экспресс-диагностики (срезы толщиной 40-60 мкм) - на замораживающем микротоме.

Окрашивание срезов. Срезы окрашивают, чтобы увеличить контрастность различных гистологических структур в препаратах, предназначенных для исследования в световом микроскопе. Разработаны разнообразные методы окраски. В процессе окрашивания происходят сложные химические и физические процессы, поэтому при выборе метода учитывают избирательное сродство клетки к определенным красителям с разными физико-химическими свойствами.

Все красители подразделяются на кислые, основные и специальные. Структуры срезов, хорошо окрашивающиеся кислыми красителями, называются оксифильными, основными красителями - базофильными; окрашивающиеся как теми, так и другими - нейтрофильными. Специальные красители селективно выявляют конкретные структуры, обладающие сродством к ним. Наиболее широко распространен комбинированный метод окраски тканей - гематоксилином и эозином. Гематоксилин (основной краситель) окрашивает ядра клеток в сине-фиолетовый цвет, а эозин (кислый) - элементы цитоплазмы в розово-желтый. Окрашенные препараты обезвоживают в спиртах восходящей концентрации (500, 700, 960, 1000), просветляют в ксилоле или некоторых маслах и затем каждый гистологический срез заключают между предметным и покровным стеклами в канадский бальзам или синтетические смолы.

Импрегнация. Для выявления отдельных элементов ткани используются различные способы импрегнации. Так, для выявления ретикулиновых волокон используется хлорид золота. Для выявления элементов центральной и периферической нервной системы обычно применяют различные способы импрегнации (серебром, золотом, осмием). Окрашивать тела нервных клеток и их отростки можно и метиленовым синим. Все эти методы имеют тот существенный недостаток, что являются эмпирическими. Поэтому всегда надо быть готовым к тому, что даже при строгом соблюдении всех условий импрегнации она часто не дает желаемого результата. Здесь имеют значение многие факторы, которые иногда трудно учесть (качество фиксации, реакция и качество воды, свойство нервной ткани и т.д.)

Готовый (постоянный) гистологический препарат можно хранить годами и использовать для микроскопирования.

Методы микроскопии. Основным инструментом гистологического препарата служит микроскоп - световой или электронный.

Световая микроскопия. С помощью световых микроскопов можно изучить на срезах тонкое строение клеток и тканей. Размер наименьшей структуры, которую можно увидеть в световом микроскопе, определяется наименьшим разрешающим расстоянием (do). У современных световых микроскопов оно составляет около 0,2 мкм.

Устройство светового микроскопа (МБР - микроскоп биологический рабочий). Данный прибор состоит из оптической системы (объективов и окуляров), механических и осветительных частей. Все они объединяются между собой с помощью штатива. В последнем различают: поставку, тубусодержатель и тубус. Сверху в тубус вставлен окуляр, а снизу к нему присоединен объектив. Передвижение тубуса осуществляется двумя винтами, один их которых - кремальера, или макровинт, - служит для грубой наводки, а другой - микровинт - для микронаводки. Предметный столик служит для помещения изучаемого объекта, который фиксируется  двумя зажимами-клеммами, крепящимися в отверстия предметного столика. Под предметным столиком расположены осветительные приспособления: осветитель (конденсор) и зеркало. С помощью зеркала через отверстие предметного столика направляется свет в объектив. Одна поверхность зеркала плоская, другая - вогнутая. При обычных лампах используют вогнутое зеркало, при специальных освещениях - плоское. Конденсор - закрепленная особым кольцом плоско-выпуклая линза, ее можно передвигать вниз и вверх. Служит он для концентрации световых лучей на объективе, он совершенно необходим при работе с сильно увеличивающими объективами. На конденсоре крепится диафрагма, позволяющая равномерно сужать и расширять отверстие для прохождения световых лучей и тем самым регулировать степень освещения объекта.

Ультрафиолетовая микроскопия - представляет собой разновидность световой. Длина волны ультрафиолетовых лучей составляет около 0,3 мкм; разрешающая способность микроскопа при иммерсионном объективе приблизительно 0,1 мкм.

Люминесцентная микроскопия основана на том, что многие органические вещества, содержащиеся в клетках, способны светиться (флуоресцировать) при поглощении ими световой энергии. Источником света в них служат ксеоновые или ртутные лампы (их спектр  близок к ультрафиолетовому излучению и лежит в пределах коротких волн длиной 0,25-0,4 мкм), а объект исследуют через специальные фильтры.

Различают собственную, или первичную флуоресценцию, которой обладают пигменты (в том числе бактерии), витамины группы А и В2 и другие вещества. Вторичную, или вызванную, флуоресценцию можно получить, используя специальные вещества - флуорохромы, которые связываются различными структурами живой клетки и вызывают их флуоресценцию. Например, при обработке срезов тканей флуорохромом акридиновым оранжевым ДНК и ее производные приобретают ярко-зеленое свечение, а РНК и ее производные - ярко-красное. Разновидностью вторичной является флуоресценция желто-зеленого цвета, индуцированная парами формальдегида и характерная  для катехоламидов (адреналин и норадреналин) мозгового вещества надпочечников. Таким образом можно исследовать химический состав тканевых структур, выявлять трофические и секреторные включения в клетках.

Электронная микроскопия.







 
 
Уважаемый посетитель, Вы зашли на сайт как незарегистрированный пользователь. Мы рекомендуем Вам зарегистрироваться либо зайти на сайт под своим именем.

Другие новости по теме:

  • Особенности анатомии домашней птицы (Реферат по анатомиии)
  • Лекции по гистологии (нервная ткань)
  • Лекции по гистологии (органы чувств)
  • Лекции по гистологии (мышечные ткани)
  • Лекции по гистологии (кожа и ее производные)


  •  (голосов: 46)
     
    Информация
    Посетители, находящиеся в группе Гости, не могут оставлять комментарии в данной новости.
     
     
     
    Авторизация
    Логин:
    Пароль:
     
     
    Партнёры
     
    Календарь
    «    Июнь 2018    »
    ПнВтСрЧтПтСбВс
     
    1
    2
    3
    4
    5
    6
    7
    8
    9
    10
    11
    12
    13
    14
    15
    16
    17
    18
    19
    20
    21
    22
    23
    24
    25
    26
    27
    28
    29
    30
     
     
    Метки
    бактерии, Болезнь, вакцина, вещество, Вирус, Возбудитель, гормоны, железы, животные, заболевание, инфекция, кислота, кислоты, кишечник, клетка, клетки, корм, кровь, Лечение, матка, мозг, молоко, натрий, оболочка, опухоль, организм, органы, печень, препарат, процесс, раствор, реакция, свиньи, скот, сосуды, сыворотка, телята, температура, ткани, функции

    Показать все теги
     
    Рекомендуем
     
     
     
    Каталог : Анатомия Физиология и этология Латинский язык Гистология Эмбриология Микробиология Вирусология Генетика Фармакология и токсикология Биохимия Патология Акушерство и гинекология Эпизоотология, инфекционные болезни Паразитология и инвазионные болезни Внутренние незаразные болезни Хирургия Зоогигиена Разведение животных Кормление, кормопроизводство
    При использовании материалов сайта, гиперссылка на на www.vetlib.ru обязательна. 
    Copyright © 2009-2017 VetLib.ru