автор: Admin 8 декабря 2010 просмотров: 40105

проб минеральных кормовых доба­вок 1—25 г (в зависимости от содержания фтора). К жидким пробам биологического материала и кормов добавляют 0,5—1 г порошка окиси кальция (СаО), к су­хим (кроме костей) — взвесь гидрата окиси кальция, настаивают в течение суток; затем высушивают, повы­шая постепенно температуру до 170—180 °С, и сжигают в муфельной печи при 400—550 °С до полного озоления.

После осторожного смачивания водой содержимое чашки количественно переносят в отгонную колбу уста­новки и нагревают до 140 °С и только после этого пуска­ют пар из кипящего парообразователя. При помощи электротрансформатора во время отгона поддерживают температуру в колбе в пределах 135—145 °С.

Из водяного холодильника в колбу собирают дистил­лят в количестве 400 мл (при низком содержании фтора можно 100—200 мл), подщелачивая его раствором едко­го натра под контролем фенолфталеина. Отгон проводят в двух-трех параллелях, обязательно ставя холостой опыт из 10 мл бидистиллированной воды.

После отгона берут 100 мл дистиллята и добавляют по 5 мл раствора ализарина моносульфата и азотно­кислого циркония, смешивают и ставят в темное место. Ровно через 60 мин определяют интенсивность окраски с помощью ФЭК-М при зеленом светофильтре в кюветах с шириной рабочих граней 50 мм.

Концентрацию фтора определяют по калибровочно­му графику, приготовленному заблаговременно из стан­дартного раствора натрия фторида, содержащего фтор от 0 до 0,3 мг/100 мл.

 

 

ЗАНЯТИЕ № 9

 

9. Тема:  ОПРЕДЕЛЕНИЕ МОЧЕВИНЫ ДИМЕТИЛГЛИОКСИМНЫМ

МЕТОДОМ

Цель занятия: освоить  определение мочевины диметилглиоксимным методом.

Материадьное обеспечение: 1.  1 г ДМГ растворяют в 100 мл этилового спирта. Раствор стойкий.

2. Реактив Ратнера: к 150 мл воды осторожно прили­вают 50 мл ортофосфорной кислоты, затем 50 мл концен­трированной серной кислоты. Реактив стойкий.

Принцип метода основан на образовании мочевиной с диметилглиоксимом (ДМГ) при нагревании в кислой среде желтого окрашивания, интенсивность которого определяют на ФЭК-М при синем светофильтре в кюве­тах с шириной рабочих граней 5 мм. Реактивы.

 Ход анализа. 1 г комбикорма, помещенного в мерную колбу на 100 мл, заливают до метки водой.

После тщательного смешивания фильтруют через слой ваты, затем к 5 мл фильтрата добавляют 5 мл 10 %-ного раствора трихлоруксусной кислоты или 96 °-ного этилового спирта, тщательно смешивают и фильтруют через бумажный фильтр.

В жидкой части содержимого рубца осаждают белки равным объемом 10 %-ного раствора трихлоруксусной кислоты или этилового спирта, затем фильтруют через бумажный фильтр.

Во флаконы из под антибиотиков вносят по 0,5 мл безбелкового фильтрата, 0,5 мл раствора ДМГ, 4,5 мл реактива Ратнера, смешивают и закрывают резиновыми пробками к флаконам с антибиотиками, в которые вставлена инъекционная игла. В контрольные пробы вместо фильтрата вносят по 0,5 мл 5 %-ного раствора трихлоруксусной кислоты.

Флаконы ставят на 1 ч в кипящую водяную баню и после охлаждения интенсивность окраски определяют на ФЭК-М.

Концентрацию мочевины определяют по калибровоч­ной кривой, приготовленной из стандартных растворов, содержащих от 1 до 10 мг % мочевины.

 

 

ЗАНЯТИЕ № 10

 

10. Тема: ОПРЕДЕЛЕНИЕ НИТРАТОВ И НИТРИТОВ В КОРМАХ

 

Цель занятия: освоить метод определения  нитратов, нитритов в кормах.

Материадьное обеспечение: Приготовление реактива Грисса. Реак­тив Грисса состоит из двух растворов: 1) 0,5 г сульфани-ловой кислоты растворяют в 150 мл 12 %-ного раствора уксусной кислоты; 2) 0,1 г альфа-нафтиламина раство­ряют в 20 мл кипящей воды, фильтруют через бумажный фильтр и смешивают с 150 мл 12 %-ного раствора уксус­ной кислоты.

Растворы хранят на холоде отдельно в бутылках темного стекла. Перед применением их смешивают в равных объемах.

Прицип метода   извлечение нитратов и нитритов из проб 2 %-ным раствором уксусной кислоты, на восста­новлении нитратов до нитритов цинковой пылью и взаи­модействии последних с реактивом Грисса.

Ход анализа. 10 г средней пробы измельченного корма заливают 200 мл 2 %-ного раствора уксусной кислоты и добавляют на кончике скальпеля порошок активированного угля. Смесь, периодически помешивая, настаивают при комнатной температуре в течение 1 ч, после чего фильтруют через простой бумажный фильтр.

Для определения нитритов в пробирку с 10 мл филь­трата вносят 0,5 мл реактива Грисса, а в контрольную 0,5 мл 12 %-ного раствора уксусной кислоты. После тщательного смешивания при наличии нитритов появля­ется розовое окрашивание, интенсивность которого оп­ределяют с помощью ФЭК-М через 15 мин при зеленом светофильтре (длина волны 536 мкм) в кюветах с шири­ной рабочих граней 10 мм против контрольной пробы.

Концентрацию нитритов определяют по заранее под­готовленному калибровочному графику из стандартных растворов нитрита натрия, содержащих в 1 мл от 0,05 до 0,6 мкг NO₂.

Для определения суммы нитратов и нитритов в про­бирки (опытную и контрольную) с 6 мл фильтрата вно­сят по 2 мл 10 %-ного раствора уксусной кислоты и на кончике скальпеля цинковую пыль (1 г порошка ме­таллического цинка тщательно в фарфоровой ступке смешивают с 10 г сульфата марганца). Пробирку встря­хивают в течение 60 с, после чего вносят 1 мл реактива Грисса и перемешивают. В контрольную пробу вместо реактива Грисса вносят 1 мл 12 %-ного раствора уксус­ной кислоты. Интенсивность розовой окраски определя­ют так же, как и в случае с нитритами.

Концентрацию нитратов определяют по калибровоч­ному графику, приготовленному из растворов калия нитрата, содержащих от 6 до 30 мкг NO_3. При этом необходимо вычесть содержание нитритов (полученную концентрацию нитритов умножить на коэффициент 1,348).

 

 

ЗАНЯТИЕ № 11

 

11. Тема: ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ОТРАВЛЕНИЯ РАСТЕНИЯМИ, СОДЕРЖАЩИМИ АЛКАЛОИДЫ

 

Цель занятия: освоить методы диагностики отравления растениями,

содержащими алкалоиды. 

Материадьное обеспечение: водяная баня, 10 %-ный раствор  серной кислоты, хлороформ, патологоанатомический материал (содержимое желудка или руб­ца, мочи, внутренние органы, мышцы), широкогорлые колбы емкостью 750 мл, виннокаменная или щавелевая кислоты.

Ход работы.

При подозрении на отравление животных алкалоидсо-держащими растениями в лабораторию направляют пробы корма, отобранные в соответствии с требования­ми Ветеринарного законодательства РК, патологоанатомический материал (содержимое желудка или руб­ца, мочи, внутренние органы, мышцы).

Обнаружение и идентификация алкалоидов осуще­ствляется в три этапа: изоляция, обнаружение в изо­лированном остатке и хроматографическая идентифи­кация.

1. Изоляция алкалоидов. 100 г измельченного кор­ма заливают дистиллированной водой в соотношении 1:4 для сочных и 1:10 для сухих. При постоянном поме­шивании содержимое подкисляют 10 %-ным раствором серной кислоты до рН 3, после чего выдерживают на водяной бане в течение 2 ч при температуре 40 °С. Вы­тяжку из сочных кормов сразу, из сухих через 24 ч на­стаивания сцеживают, фильтруют в делительную ворон­ку и обрабатывают 2 раза 30 мл хлороформа.

После отделения хлороформа водную вытяжку под­щелачивают 10 %-ным раствором аммиака до рН 9 и 3 раза обрабатывают хлороформом по 50, 30 и 20 мл, сливая после отделения в одну емкость. Затем фильтру­ют ее через смоченный хлороформом бумажный фильтр и оставляют в вытяжном шкафу. Для обнаружения алкалоидов используют полученные из щелочного во­дного извлечения хлороформенные вытяжки.

2. Изоляция алкалоидов из патматериала. Навески измельченного патматериала до 100 г поме­щают в широкогорлые колбы емкостью

Уважаемый посетитель, Вы зашли на сайт как незарегистрированный пользователь. Мы рекомендуем Вам зарегистрироваться либо зайти на сайт под своим именем.