Главная Регистрация Статистика Контакты RSS 2.0
   
 
 
Навигация
Главная Все статьи сайта Мировые новости Обратная связь Непрочитанное
 
 
Базовые дисциплины
Анатомия Физиология и этология Латинский язык Цитология Гистология Эмбриология Микробиология Иммунология Генетика Вирусология Фармакология и токсикология
 
 
Естественно-научные дисциплины
Химия Биохимия
 
 
Специальные и клинические дисциплины
Патология Акушерство и гинекология Эпизоотология, инфекционные болезни Паразитология и инвазионные болезни Внутренние незаразные болезни Хирургия
 
 
Другие дисциплины
Зоогигиена Разведение Кормление, кормопроизводство
 
 
Ветеринарная онлайн-библиотека » Новости » Лабораторно практические занятия по токсикологии

Новости , Фармакология и токсикология : Лабораторно практические занятия по токсикологии
автор: Admin 8 декабря 2010 просмотров: 40106






раствора серной кислоты. Смесь выдерживают 15 мин, после чего госсипол трижды переэкстрагируют хлороформом в объеме 15, 10 и 10 мл. Хлороформенный экстракт фильтруют через бумажный фильтр в стеклянный низкий бюкс и ставят для испарения в вытяжной шкаф. Сухой остаток хранят в закрытом бюксе в темном сухом месте. Для исследования сухой остаток растворяют в 1 мл хлороформа.

Качественная реакция обнаружения госсипола.

0,1 мл хлороформенного раствора сухого остатка наносят на полоску хроматографической бумаги (10Х 4 см) с левой стороны, отступая от края 3 см. На расстоянии 3 см от пробы наносят 0,1 мл стандартного госсипола (5 мг госсипола растворяют в 50 мл хлороформа). После высыхания места нанесения растворов проявляют путем проводки через раствор проявителя (20 г флороглюцина, 100 мл этилового спирта, 10 мл концентрированной соляной кислоты). При появлении в исследуемой пробе красного или малинового пятна (как и в стандартном растворе госсипола) дают заключение о наличии госсипола в пробе. В дальнейшем проводят хроматографический анализ.

 

 

ЗАНЯТИЕ № 15

 

15. Тема: ОПРЕДЕЛЕНИЕ ТОКСИЧНОСТИ  ПАТОГЕННЫХ ГРИБОВ

Цель занятия: освоить метод определения токсичности патогенных грибов.

Материальное обеспечение: Лабораторные животные (белые мышы, крысы, кролики, голуби, котята), микроскоп, фильтр Зейца, шприцы, инъекционные иглы, пробирки и др.

Ход работы

В дифференциальной диагностике микотоксикозов важнейшую роль играет определение токсичности ядов. С этой целью выращенную на агаре культуру патогенных грибов с их ядовитыми продуктами скармливают животным тех видов, среди которых выявлено заболевание. Часто биологическую пробу ставят на лабораторных объектах.

Сначала готовят экстракты из выращенных на плотных средах культур. Пленку гриба помещают в пробирку, заливают водопроводной водой и оставляют на 24 ч при температуре 4—10 °С.

Через сутки на предметное стекло наносят одну каплю, взвеси простейших (парамециум каудатум) и две капли исследуемого экстракта, после чего наблюдают в течение 2- ч, периодически просматривая объект исследования под малым увеличением микроскопа. Высокотоксичные экстракты патогенных грибов убивают парамеций в первые 3 мин. Токсичные экстракты губительно воздействуют на парамеций в течение 8—10 мин, слаботоксичные грибы ни морфологических изменений, ни гибели парамеций не вызывают.

Широко известен способ определения токсичности грибов на животных. Для этого необходимо приготовить стерильные экстракты из культур гриба, для чего берут навеску культуры и заливают ее стерильным физиологическим раствором в соотношении 1:3, выдерживают 1 ч при постоянном помешивании. Полученный экстракт отжимают через несколько слоев марли и фильтруют через фильтр Зейца.

Лабораторным животным (белым мышам, крысам, кроликам, голубям, котятам) его вводят подкожно в объеме 0,5—3 мл, внутрибрюшинно — 0,5—20 мл. За животными наблюдают в течение 2 нед. Если культура гриба токсична, то у них развивается токсикоз (общее угнетение, тремор, парезы). При подкожном введении возможна местная воспалительная реакция, при внутрибрюшинном — перитонит.

Из химических методов обнаружения ядов патогенных грибов доступны для практики пробы с соляной и трихлоруксусной кислотами.

В пробирку берут несколько капель эфирного экстракта из культуры гриба и добавляют I—2 капли кислоты. При положительной реакции на токсины грибов из рода фузариум содержимое пробирки приобретает ярко-красный цвет при добавлении соляной кислоты и зеленый цвет при добавлении трихлоруксусной кислоты.

Важное значение имеют методы определения токсичности кормов. Наиболее известна для этих целей кожная проба. Для приготовления экстракта берут 50 г корма, измельчают, если нужно подсушивают, затем в аппарате Соксклета экстрагируют токсины эфиром в течение 6 ч. Экстракт упаривают до 10—15 мл. Токсины можно извлекать в стеклянных колбах или банках. Берут 100 г сена, измельчают, заливают 200 мл эфира, настаивают в течение 24 ч при комнатной температуре и упаривают на водяной бане до густой консистенции.

После этого на выстриженный участок кожи кролика дважды с интервалом в одни сутки наносят полученный экстракт, принимая меры, чтобы кролик не смог слизать исследуемый экстракт. Учет реакции проводят в течение 3—7 дней.

По степени токсичности различают:

первую степень — покраснение кожи, повышение чувствительности, шелушение;

вторую степень — покраснение, болезненность, шелушение, утолщение кожи, мелкая сыпь в виде пузырьков темноватого окрашивания;

третью степень — покраснение, выраженное утолщение кожи, болезненность и складчатость, поверхностный некроз, образование струпа;

четвертую степень — покраснение, сильный отек в виде валика на нижней границе участка, сухой некроз, сплошной толстый струп.

Токсичность кормов устанавливают также биопробой на животных по клиническим признакам и данным патологоанатомических изменений. Это достигается путем скармливания белым мышам испорченного корма с предварительной выдержкой их на голоде или введением под кожу экстрактов исследуемых кормов. Иногда проводят пробу на бородках кур. Исследуемый экстракт вводят в одну из бородок, а вторая служит контролем. Степень воспалительной реакции бородки служит показателем токсичности экстракта.

В настоящее время получил широкое распространение метод тонкослойной хроматографии. Он дает возможность определить состав и количество ядов микозного происхождения.

 

 

ЗАНЯТИЕ № 16

 

16. Тема: ФЕРМЕНТНЫЙ МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФОСС

 

Цель занятия: освоить  ферментный метод определения ФОС.

Материальное обеспечение:  Раствор № 1. Берут 200 мг бромтимолового синего и растирают в ступке с 20 мл 0,1 н. раствора едкого натра до растворения. Синий раствор из ступки перено­сят в литровую мерную колбу. В нее вливают 50 мл 0,1 М раствора борной кислоты в 0,1 М растворе хлори­стого калия и доводят дистиллированной водой до 1 л. Раствор должен иметь интенсивно-синюю окраску и рН 8,4.

Раствор № 2. К 9,75 мл раствора № 1 добавляют 0,25 мл 0,1 н. раствора соляной кислоты. Раствор до­лжен иметь желтое окрашивание и рН 3,5.

Раствор Л£ 3. К 1,8 мл раствора № 1 добавляют 0,2 мл 1 %~ного раствора ацетилхолинхлорида (9:1).

Принцип метода основан на определении интенсивности угнетения активности ацетилхолинэстеразы при инку­бации нормальной сыворотки крови лошади, экстракта из патматериала и раствора ацетилхолинхлорида. Сте­пень угнетения фермента устанавливают по изменению окраски бромтимолового синего под воздействием обра­зующейся уксусной кислоты от синей до зеленовато-желтой.

 Ход анализа. К 25 г измельченной навески до­бавляют 25 мл бензола и экстрагируют при помешива­нии в течение 1 ч. 0,025 мл экстракта микропипеткой вводят в уленгутовскую пробирку. Туда же добавляют 0,025 мл лошадиной сыворотки крови и 2 мл раствора № 3. Одновременно готовят колориметрический стан­дарт (раствор № 2) и контроль. В контрольную пробир­ку вместо экстракта заливают дистиллированную воду. По скорости изменения окраски от интенсивно-синего до желтого в пробирке с исследуемым экстрактом по срав­нению с контролем определяют наличие или отсутствие фосфорорганического пестицида в пробе.

Этот метод используют для определения остатков ДДВФ, диброма, циодрина; после концентрирования экстрактов — хлорофоса и амидофоса.

 

 

ЗАНЯТИЕ № 17

 

17. Тема: Общие меры профилактики микотоксикозов

Цель занятия: освоить общие меры профилактики микотоксикозов.

Меры  профилактики микотоксикозов предусматривают скармливание животным доброкачественных кормов, которые заготавливают в оптимальные сроки. Злаки необходимо скащивать до цветения, хорошо их просушивать, правильно хранить в скирдах, укрывая сено пленкой или слоем соломы. Особое внимание должно быть уделено







 
 
Ключевые теги: натрий, раствор, корм, вода, калий
Уважаемый посетитель, Вы зашли на сайт как незарегистрированный пользователь. Мы рекомендуем Вам зарегистрироваться либо зайти на сайт под своим именем.

Другие новости по теме:

  • Ветеринарно-санитарная экспертиза консервов (методичка)
  • Ветеринарно-санитарная экспертиза рыбы (методичка)
  • РАЗБАВЛЕНИЕ, ХРАНЕНИЕ И ТРАНСПОРТИРОВКА СПЕРМЫ (реферат)
  • Ветеринарная рецептура (учебно-методическое пособие) - жидкие и газообразны ...
  • Лабораторно практические занятия по фармакологии


  •  (голосов: 8)
     
     
     
    Авторизация
    Логин:
    Пароль:
     
     
    Партнёры
     
    Календарь
    «    Январь 2021    »
    ПнВтСрЧтПтСбВс
     
    1
    2
    3
    4
    5
    6
    7
    8
    9
    10
    11
    12
    13
    14
    15
    16
    17
    18
    19
    20
    21
    22
    23
    24
    25
    26
    27
    28
    29
    30
    31
     
    Метки
    бактерии, Болезнь, вакцина, вещества, вещество, Вирус, Возбудитель, диагностика, железы, животные, заболевание, инфекция, кислота, кислоты, кишечник, клетка, клетки, корм, кровь, Лечение, матка, мозг, молоко, натрий, оболочка, опухоль, организм, органы, печень, препарат, процесс, раствор, реакция, свиньи, скот, телята, температура, ткани, функции, энергия

    Показать все теги
     
    Рекомендуем
     
     
     
    Каталог : Анатомия Физиология и этология Латинский язык Гистология Эмбриология Микробиология Вирусология Генетика Фармакология и токсикология Биохимия Патология Акушерство и гинекология Эпизоотология, инфекционные болезни Паразитология и инвазионные болезни Внутренние незаразные болезни Хирургия Зоогигиена Разведение животных Кормление, кормопроизводство
    При использовании материалов сайта, гиперссылка на на www.vetlib.ru обязательна. 
    Copyright © 2009-2017 VetLib.ru {mnt}